Sicherheit und Verträglichkeit mesenchymaler Stammzellen aus der Wharton-Sulze bei Patienten mit Duchenne-Muskeldystrophie: Eine klinische Phase-1-Studie

Wichtigste Punkte und Ergebnisse:

Unter den veröffentlichten Studien kommt diese kleine koreanische Studie der Art von Zellen, die in unserer Klinik verwendet werden, am nächsten. Mesenchymale Stammzellen aus der Nabelschnur (Wharton-Sulze) eines Spenders wurden Jungen mit Duchenne-Muskeldystrophie (DMD) über eine Vene gegeben. Die Studie war eine regulierte Phase-1-Studie, genehmigt vom koreanischen Ministerium für Lebensmittel- und Arzneimittelsicherheit und durchgeführt am Samsung Medical Center in Seoul.

Sechs Jungen wurden aufgenommen, erhielten je eine einzelne Infusion und wurden 12 Wochen lang beobachtet. Es gab keine schwerwiegenden unerwünschten Ereignisse und keine dosislimitierende Toxizität. Funktionstests nach 12 Wochen zeigten keine signifikante Veränderung, und im Durchschnitt nahmen Gehfähigkeit und motorische Scores ab. Die Autoren geben an, dass die Ergebnisse nicht ausreichten, um eine Wirksamkeit zu zeigen. Es gab keine Kontrollgruppe.

Ziel:

Die Sicherheit, Verträglichkeit und Dosis von EN001 zu bestimmen, einem allogenen Produkt aus mesenchymalen Stammzellen der Wharton-Sulze aus frühen Passagen, bei Kindern mit DMD. Die Wirksamkeit wurde nur explorativ untersucht.

Methoden:

Die Studie verwendete ein offenes Design mit Dosissteigerung („3+3“). Drei Jungen erhielten die niedrige Dosis, und ein Sicherheitsprüfungsgremium untersuchte ihre Daten, bevor drei weitere die hohe Dosis erhielten. Als dosislimitierende Toxizität galt jedes unerwünschte Ereignis vom Grad 3 oder höher innerhalb von 2 Wochen nach der Infusion.

Sieben Jungen wurden gescreent und sechs zwischen Januar und Oktober 2022 aufgenommen. Einschlusskriterien:

• Männlich, 2 bis 18 Jahre alt
• Eine bestätigte DMD-Mutation und klinische Zeichen der DMD (proximale Schwäche, watschelnder Gang, Gowers-Zeichen)
• Stabile Dosis systemischer Kortikosteroide, die voraussichtlich über die gesamte Zeit gleich bleibt

Ausgeschlossen wurden Jungen mit einer linksventrikulären Ejektionsfraktion unter 50% in der Echokardiografie, mit Bedarf an Atemunterstützung oder Beatmung über Tracheostoma, mit Gentherapie oder Ataluren in den vorangegangenen 24 Wochen oder mit klinisch bedeutsam auffälligen Blutwerten im Screening.

Die Teilnehmer waren 10,0 bis 15,8 Jahre alt und alle noch gehfähig, mit Ausgangswerten der Sechs-Minuten-Gehstrecke von 231 bis 346 Metern und Werten der North Star Ambulatory Assessment (NSAA) von 8 bis 28 von 34. Fünf erhielten Deflazacort und einer Prednisolon.

Eine Charge von Zellen aus einer einzelnen gespendeten Nabelschnur wurde über drei Passagen (etwa 20 Tage) in Medium mit 10% fetalem Rinderserum vermehrt und dann in flüssigem Stickstoff mit 5 Millionen Zellen pro 10-mL-Beutel eingefroren. Die Freigabetests umfassten Sterilität, Mykoplasmen, Endotoxin, Zellzahl, Vitalität und Oberflächenmarker (positiv für CD44, CD73, CD90, CD105, CD166 und negativ für CD11b, CD14, CD19, CD34, CD45, HLA-DR).

Die niedrige Dosis betrug 500.000 Zellen pro kg. Die hohe Dosis betrug 2,5 Millionen Zellen pro kg, die Dosis, die bei der mdx-Maus gewirkt hatte. In der Praxis erhielten die Jungen mit hoher Dosis 140 bis 201 mL Zellsuspension.

Die Beutel wurden im 37°C warmen Wasserbad aufgetaut und innerhalb von 10 Minuten intravenös infundiert. Die Prämedikation lag im Ermessen des Prüfarztes und bestand aus Hydrocortison 1 bis 2 mg/kg, Lorazepam 0,1 mg/kg, Ondansetron und Chlorphenamin. Vitalzeichen, Sauerstoffsättigung und EKG wurden durchgehend überwacht.

Unerwünschte Ereignisse und die Serum-Kreatinkinase (CK) wurden bei jedem von sieben Besuchen erfasst. Spirometrie, Dynamometerkraft der Kniestrecker und Ellenbogenbeuger, NSAA und der Sechs-Minuten-Gehtest erfolgten zu Beginn und in Woche 12. Zwischendaten bis Woche 36 stehen im Zusatzmaterial. Eine Nachbeobachtung bis zu 5 Jahren ist geplant.

Ergebnisse:

Sicherheit: In 12 Wochen gab es 18 unerwünschte Ereignisse, 6 in der Gruppe mit niedriger Dosis und 12 in der Gruppe mit hoher Dosis. Jeder Junge hatte mindestens eines. Alle waren Grad 1, und keines war schwerwiegend.

• Rötung, Schmerz und Schwellung an der Infusionsstelle traten bei 2 von 3 Jungen in der Gruppe mit hoher Dosis und bei keinem in der Gruppe mit niedriger Dosis auf. Sie klangen innerhalb eines Tages ab.
• Kopfschmerzen bei 3 Jungen (1 niedrige Dosis, 2 hohe Dosis). Ein Junge war etwa einen Tag lang vom Geruch des Produkts gestört.
• Weitere waren Dyspepsie, Brustschmerz und Druckempfindlichkeit (je ein Junge, niedrige Dosis), Knochenschmerz (ein Junge, hohe Dosis), SARS-CoV-2-Infektion bei 2 Jungen und eine Erkältung bei 2.
• Kein Fieber, keine Blutdruckveränderung, kein Hautausschlag, keine Atemnot und kein Schock bei irgendeiner Infusion.
• Bis Woche 36 kamen drei weitere Ereignisse vom Grad 1 hinzu (21 insgesamt). Keine verzögerten Ereignisse wurden den Zellen zugeschrieben.
• Echokardiogramme bei vier Jungen nach 6 bis 12 Monaten waren normal.

Motorische Funktion: Der mittlere NSAA-Wert fiel in der Gruppe mit niedriger Dosis um 3,33 Punkte und in der Gruppe mit hoher Dosis um 3,00 Punkte über 12 Wochen. Die einzelnen Werte gingen von 18 auf 15, von 25 auf 17, von 18 auf 19, von 8 auf 5, von 28 auf 22 und von 14 auf 14. Ein Junge gewann einen Punkt, einer blieb gleich und vier verschlechterten sich, einer davon um 8 Punkte.

Die Sechs-Minuten-Gehstrecke nahm im Durchschnitt um 13,8 Meter (niedrige Dosis) und 47,4 Meter (hohe Dosis) ab. Ein Junge von sechs ging weiter als zu Beginn.

Die Kraft der Kniestrecker nahm in der Gruppe mit niedriger Dosis um 0,70 lb ab und stieg in der Gruppe mit hoher Dosis um 0,88 lb. Vier von sechs Jungen hatten einen gewissen Anstieg. Die Kraft der Ellenbogenbeuger nahm bis Woche 36 leicht ab.

Atmung: Die prozentual vorhergesagte forcierte Vitalkapazität stieg um 6,67% (niedrige Dosis) und 1,00% (hohe Dosis), beides statistisch nicht signifikant. Ein Junge konnte den Test in Woche 12 wegen Knochenschmerzen nicht durchführen. Inspiratorische und exspiratorische Drücke veränderten sich nicht.

CK: Die Werte tendierten bis Woche 12 nach unten, ohne statistische Signifikanz, und kehrten danach bei allen Jungen auf den Ausgangswert zurück. Bei einigen Jungen stieg die CK stark an, während sie COVID-19 hatten. Die Autoren geben an, sie hätten nicht beurteilen können, ob der Rückgang ein Behandlungseffekt oder eine normale Schwankung war.

Schlussfolgerungen:

Die Autoren schließen, dass eine einzelne intravenöse Dosis dieser Zellen bei sechs Jungen mit DMD sicher und gut verträglich war und dass sich eine Wirksamkeit nur durch größere, randomisierte Studien mit wiederholter Gabe belegen lasse. Sie haben eine multizentrische, randomisierte, doppelblinde, placebokontrollierte Phase-1/2-Studie registriert (NCT06328725).

Als Einschränkungen nennen sie eine einzelne Dosis, eine sehr kleine Stichprobe, 12 Wochen Nachbeobachtung, wo die meisten DMD-Studien 1 bis 2 Jahre laufen, und COVID-19-Infektionen, die die Messungen störten. Hinzu kommt, dass es keine Kontrollgruppe gab und bei Jungen von 10 bis 15 Jahren ohnehin eine Verschlechterung zu erwarten wäre, sodass die funktionellen Ergebnisse nicht zeigen können, ob die Zellen in der einen oder anderen Richtung einen Unterschied machten.

Hintergrundinformationen:

Die Autoren behaupten nicht, dass die Zellen zu Muskel werden. Aufgrund ihrer Arbeiten an der Maus vermuten sie, dass die Zellen schützende Faktoren freisetzen: XCL1 (Lymphotactin), das nach ihrem Bericht Muskelzellen vor dem programmierten Zelltod schützt, und MMP-1, das nach ihrem Bericht die Vernarbung im Muskel verringert. Sie argumentieren, dass Zellen der Passage 3 wirksamer und in der Kultur weniger alterungsanfällig sind als die Zellen späterer Passagen, die in vielen Produkten verwendet werden, weshalb ihre Dosis niedriger ist als in anderen MSC-Studien.

Die Autoren weisen darauf hin, dass vorübergehendes Fieber die häufigste Nebenwirkung von Zellinfusionen ist, und führen es teilweise auf die Trägerflüssigkeit zurück. Sie verwendeten ihre eigene xenofreie Formulierung und verzeichneten bei den sechs Jungen kein Fieber. Bei so wenigen Teilnehmern lässt sich aus dieser Beobachtung keine Schlussfolgerung ziehen.

Die Zellen wurden von ENCell Co., Ltd. geliefert, dem Entwickler des Produkts. Das Papier gibt an, dass der Sponsor keine Rolle bei der Interpretation der Daten oder beim Verfassen des Berichts hatte, und die Autoren erklärten keine Interessenkonflikte. Die Finanzierung kam aus koreanischen staatlichen Fördermitteln für Gesundheitsforschung und vom Samsung Medical Center.